ความเห็นเพิ่มเติมที่ 1 5 ต.ค. 2551 (02:06)

Total polyphenol content น่าจะหมายถึงปริมาณสารที่ประกอบด้วย polyphenol ทั้งหมดที่มีอยู่นะคะ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 2 6 พ.ย. 2551 (04:46)

Total polyphenol content ก็คือ ปริมาณสารประกอบโพลีฟีนอลทั้งหมด ซึ่งเวลาเค้าหาจะหาเทียบกับสารมาตรฐาน เช่น ปริมาณสารประกอบโพลีฟีนอลทั้งหมดเทียบกับ tannic acid อะไรประมาณนั้น

phloroglucinol equivalents จากคำนี้น่าจะเดาได้ว่าเค้าน่าจะหาสารต้านออกซิเดชันในสารสกัดพืช แล้วเอามาเทียบกับ phloroglucinol เพราะว่า phloroglucinol เมื่อดูโครงสร้างแล้วจะเป็นสารต้านอนุมูลอิสระได้ เพราะมันเป็นพวกสารประกอบฟีโนลิก (Phenolic compounds) ถ้าสนใจเพิ่มเติมพวกตำราเภสัชเวทน่าจะมีน่ะ (แต่ส่วนใหญ่จะเป็นอังกิด Pharmacognosy) แต่ที่เราจำได้ phloroglucinol มันได้มาจาก Hop ซึ่งใช้ในอุตสากรรมเบียร์

การตรวจหาปริมาณสารฟีโนลิกทั้งหมด (total phenolic compound)
    การตรวจหาปริมาณสารฟีโนลิกทั้งหมดในสารสกัด โดยใช้วิธี Folin-Ciocalteu(Singleton & Rossi,1965) โดยนำสารสกัดที่ละลายด้วยเอทานอล จำนวน 50 ไมโครลิตร ผสมกับ Folin reagent จำนวน 250 ไมโครลิตร และสารละลาย 20% sodium carbonate จำนวน 250 ไมโครลิตร เติมน้ำกลั่นจนครบ 5 มิลลิลิตร ผสมให้เข้ากัน จากนั้นทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องในที่มืดเป็นเวลา 30 นาที นำไปวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 765 นาโนเมตร นำค่าการดูดกลืนแสงที่ได้ไปวัดหาปริมาณสารประกอบฟีโนลิคจากกราฟมาตรฐานระหว่างความเข้มข้นของ gallic acid และค่าการดูดกลืนแสงในหน่วย gallic acid equivalents (GAE) มิลลิกรัม/กรัม น้ำหนักแห้ง

Ferric Reducing Ability Power (FRAP) Assay
   วิธีนี้เป็นการวัดสมบัติการต้านออกซิเดชั่น โดยอาศัยหลักการว่าสารต้านออกซิเดชั่นทำให้ที่ให้อิเล็กตรอนจึงจัดเป็นสารรีดิวซ์ (reducing agent) ดังนั้นจึงกล่าวได้ว่า Total Antioxidant Capacity (TAC) เป็นการวัดความสามารถรวมในการรีดิวซ์ โดยใช้สารประกอบเชิงซ้อนของเหล็ก เฟอริค Fe³⁺ -TPTZ (ferric tripyridyltriazine) เป็นสารทดสอบ อะตอมของเหล็กในสารนี้จะถูกรีดิวซ์โดยสารต้านออกซิเดชั่น ได้สารประกอบเชิงซ้อนของเหล็กเฟอรัส Fe²⁺-TPTZ ซึ่งมีสีน้ำเงิน ดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 593 นาโนเมตร
  การตรวจหาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระในสสารสกัดมุนไพร ด้วยเทคนิค FRAP (SzöllÖsi & Varga-SzöllÖsi ,2002) โดยนำสารสกัด ปริมาตร 1 มิลลิลิตร มาเจือจางในเอทานอล 10 มิลลิลิตร ใน volumetric flasks จากนั้นนำสารสกัดที่ได้ 0.1 มิลลิลิตร เติมลงไป 3.0 มิลลิลิตร FRAP reagent (25 มิลลิลิตร ของ acetate buffer 300 มิลลิโมล/ลิตร pH 3.6 กับ 2.5 มิลลิตร ของ 10 มิลลิโมล/ลิตร TPTZ ในส่วนผสมของ 40 มิลลิโมล/ลิตร HCl และ 2.5 มิลลิลิตร FeCl₃.6H₂O 20 มิลลิโมล/ลิตร) จากนั้นตั้งทิ้งไว้ 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง แล้ววัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 593 นาโนเมตร โดยใช้ตัวทำละลายปริมาตร 0.1 มิลลิลิตร แทนสารสกัดเป็น blank คำนวณค่า activity จากกราฟมาตรฐานของ L-ascorbic acid (0.2-1 มิลลิโมล/ลิตร)ผลที่ได้แสดงค่าเป็น ascorbic acid equivalents (AAE)/มิลลิกรัมน้ำหนักแห้งของพืช

จริงๆแล้วเราวิชาทางเภสัชศาสตร์เวทมันจะมีวิธการหาสารต้านออกซิเดชันหลายวิธีน่ะ ถ้าสนใจถามได้คับ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 3 27 ธ.ค. 2551 (15:40)

อยากจะทราบหลักการของ Folin - Ciocalteu และ FRAP assay ค่ะ
ใครทราบช่วยบอกหน่อยได้ไหมค่ะ จะนำข้อมูลไปทำสัมมนานะค่ะ
รบกวนด้วยนะค่ะ    ....... ขอบคุณค่ะ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 4 27 ก.ค. 2552 (18:10)

Ferric Reducing Ability Power (FRAP) Assay
   วิธีนี้เป็นการวัดสมบัติการต้านออกซิเดชั่น โดยอาศัยหลักการว่าสารต้านออกซิเดชั่นทำให้ที่ให้อิเล็กตรอนจึงจัดเป็นสารรีดิวซ์ (reducing agent) ดังนั้นจึงกล่าวได้ว่า Total Antioxidant Capacity (TAC) เป็นการวัดความสามารถรวมในการรีดิวซ์ โดยใช้สารประกอบเชิงซ้อนของเหล็ก เฟอริค Fe³⁺ -TPTZ (ferric tripyridyltriazine) เป็นสารทดสอบ อะตอมของเหล็กในสารนี้จะถูกรีดิวซ์โดยสารต้านออกซิเดชั่น ได้สารประกอบเชิงซ้อนของเหล็กเฟอรัส Fe²⁺-TPTZ ซึ่งมีสีน้ำเงิน ดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 593 นาโนเมตร
  การตรวจหาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระในสสารสกัดมุนไพร ด้วยเทคนิค FRAP (SzöllÖsi & Varga-SzöllÖsi ,2002) โดยนำสารสกัด ปริมาตร 1 มิลลิลิตร มาเจือจางในเอทานอล 10 มิลลิลิตร ใน volumetric flasks จากนั้นนำสารสกัดที่ได้ 0.1 มิลลิลิตร เติมลงไป 3.0 มิลลิลิตร FRAP reagent (25 มิลลิลิตร ของ acetate buffer 300 มิลลิโมล/ลิตร pH 3.6 กับ 2.5 มิลลิตร ของ 10 มิลลิโมล/ลิตร TPTZ ในส่วนผสมของ 40 มิลลิโมล/ลิตร HCl และ 2.5 มิลลิลิตร FeCl₃.6H₂O 20 มิลลิโมล/ลิตร) จากนั้นตั้งทิ้งไว้ 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง แล้ววัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 593 นาโนเมตร โดยใช้ตัวทำละลายปริมาตร 0.1 มิลลิลิตร แทนสารสกัดเป็น blank คำนวณค่า activity จากกราฟมาตรฐานของ L-ascorbic acid (0.2-1 มิลลิโมล/ลิตร)ผลที่ได้แสดงค่าเป็น ascorbic acid equivalents (AAE)/มิลลิกรัมน้ำหนักแห้งของพืช

Folin-Ciocalteu’s reagent

โดยใช้ gallic acid เป็นสารมาตรฐาน

วิธีทดสอบ

1.

2.

+ Folin-Ciocalteu’s reagent 100

เตรียมสารละลายสารตัวอย่าง ความเข้มข้น 0.1 mg/mlสารละลายตัวอย่าง 20 μlμl

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 5 14 ส.ค. 2552 (11:14)

วิธี  Folin-Ciocalteu(Singleton & Rossi,1965)  หลักการการวิเคราะห์สารประกอบฟีนอลิคโดยวิธี  Folin-Ciocalteu  อาศัยการเกิดปฏิกิริยารีดักชั่น ของสารประกอบจำพวกฟีนอล โดยสารละลาย Folin-Ciocalteu ในสภาวะที่เป็นด่างให้สารประกอบเชิงซ้อนสีน้ำเงินซึ่งสามารถวิเคราะห์หาปริมาณได้โดยวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 765 นาโนเมตร แล้วนำไปเปรียบเทียบกับกราฟมาตรฐานซึ่งอาจใช้กรดแทนนิค กรดแกลลิค หรือคาทีชิน เป็นตัวแทนของสารประกอบฟีนอลิค

 

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 6 21 ก.ย. 2552 (15:46)

mg CEQ/100g fresh weight� CEQ ย่อมาจาก

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 7 16 ก.ค. 2553 (18:01)
อยากทราบหลักการ ferrous ion oxidation- xylenol orange (FOX) assay ค่ะ
ใครทราบช่วยบอกหน่อยได้ไหมค่ะ จะนำข้อมูลไปทำสัมมนานะค่ะ
รบกวนด้วยนะค่ะ ....... ขอบคุณค่ะ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 8 23 ส.ค. 2553 (16:01)
ต้องการทราบวิธีการทดสอบหาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระโดยใช้วิธี ORAC รบกวนช่วยแนะนำและอธิบายด้วยครับ ขอบคุณครับ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 9 12 มิ.ย. 2554 (14:30)
อยากทราบไกไกลการต้านสารอนุมูลอิสระค่ะ ของสารพวก isoflavoniod เมื่อมาเจออนุมูลอิสระ ขอเป็นแมคานิซึมด้วยนะค่ะ จะนำไปสัมมนาค่ะ ขอบคุณค่ะ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 10 16 ต.ค. 2554 (23:06)
อยากทราบวิธีวิเคราะห์หา anthocyanidin ค่ะ รบกวนด้วยนะคะ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 11 31 ม.ค. 2555 (20:37)
อยากรู้ว่า Bioaccesibility คืออะไร ประโยชน์ โทษ หลักการ ต้องใชในการสัมมนามันที่ 17 กุมภาพันธ์ 2555 ขอความกรุณาตอบด่วนค่ะ ขอบคุณค่ะ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 12 7 มิ.ย. 2555 (08:51)
Total polyphenol content : หาปริมาณสารประกอบฟีโนลิคจากกราฟมาตรฐานระหว่างความเข้มข้นของ gallic acid และค่าการดูดกลืนแสงในหน่วย gallic acid equivalents (GAE) มิลลิกรัม/กรัม น้ำหนักแห้ง
คำนวนอย่างไรค่ะ เมือ่ได้ค่าดูดกลืนแสงของตัวอย่างแล้วจะทราบได้อย่างไรว่ามีความเข้มข้นเท่าใดของgallic acid แล้วต้องเทียบเป็น 1กรัมหรือเปล่าเพราะตัวอย่างเราชั่ง มา 5 กรัม ค่ะ ขอบคุณค่ะ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 13 22 มิ.ย. 2555 (01:35)
อยากทราบว่า Folin-Ciocalteu reagent ประกอบด้วยสารอะไรบ้าง สามารถหาซื้อได้จากที่ไหนบ้างค่ะ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 14 22 มิ.ย. 2555 (07:51)

ข้อ 13 ลองกูเกิ้ลดูหรือยัง เช่น http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/docs/Sigma/Datasheet/6/47641dat.Par.0001.File.tmp/47641dat.pdf

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 15 28 ส.ค. 2555 (15:25)
aluminum chloride colorimetric method หลักการเป็นอย่างไรค่ะ

ความเห็นเพิ่มเติมที่ 16 28 มี.ค. 2556 (16:06)
การหาฟีนอลใเครื่องดื่มชาเขียวที่มีนำ้ตาลเราสามาทำกราฟมาตราฐานแบบใดได้บ้างอ่ะ

จำไว้ตลอด