|
อยากรู้เรื่องการสกัด DNA ค่ะ
โพสต์เมื่อ:
00:13 วันที่ 6 ก.ย. 2549 ชมแล้ว:
721 ตอบแล้ว:
5
อยากทราบเรื่องวิธีการสกัด DNA ของพืชและสัตว์ค่ะ (ขอวิธีทำอย่างละเอียด) ตั้งแต่นำตัวอย่างมาบด จนกระทั้งอ่านผลเทียบ marker ค่ะ
จำนวน 4 ความเห็น, หน้า่ | -1- วิธีสกัด DNA ง่าย ๆ ก็สกัดจากหัวหอมไม่ก็มะเขือเทศ แนะนำให้ใช้มะเขือเทศดีก่าน่ะ เพราะมันสีแดงจะทำให้เห็น DNA ชัดหน่อย อุปกรณ์ 1.มะเขือเทศ 1 ลูก 2.แอลกอฮอล 95% แช่เย็น 3.น้ำยาล้างจาน (ผสมน้ำในอัตราส่วน 1/9) 4.NaCl (เกลือ) (เกลือใช้ประมาณครึ่งช้อนชาก็พอ) 5.เครื่องปั่นน้ำผลไม้ 6.ที่กรอง 7.มีด เขียง 8.แก้วน้ำ 9.หลอดทดลอง วิธีทำ 1.หั่นมะเขือเทศเป็นชิ้นเล็ก ๆ หน่อยเป็นลูกเต๋าแต่ไม่ต้องเล็กมาก 2.ใส่มะเขือเทศลงในเครื่องปั่นน้ำผลไม้(ใส่น้ำลงไปหน่อยให้คลุกคลิก)ใช้เวลาในการปั่นก็แค่ประมาณ 10 วินาทีก็พอ หรือไม่ก็พอดูให้เนื้อมะเขือเทศมันละเอียดหน่อยแต่อย่าให้ละเอียดมากเดี๋ยวDNA จะขาดซะหมด 3.หลังจากปั่นก็ให้เอาที่กรองกรองเฉพาะน้ำมะเขือเทศใส่ในแก้ว 4.จากนั้นให้นำน้ำยาล้างจานและเกลือใส่ลงไปคนให้เข้ากัน 5.เทน้ำมะเขือเทศที่ผสมน้ำยาล้างจานและเกลือใส่ในหลอดทดลองให้ได้ประมาณ 10 ml ***ขั้นตอนน้ำสำคัญนิดนึงน่ะครับ 6.นำแอลกอฮอลที่แช่เย็นไว้มาเทใส่ในหลอดทดลองที่มีน้ำมะเขือเทศที่เราผสมเรียบร้อยแล้ว ค่อย ๆ เทน่ะครับเอียงหลอดที่มีน้ำมะเขือเทศเยอะ ๆ ค่อย ๆ เท เทเบา ๆ ถ้าเทแรงไป DNA จะฟุ้งกระจาย เทแอลกอฮอลประมาณ 10 ml หลังจากเทเสร็จแล้วให้ตั้งหลอดไว้ให้ตรงห้ามเขย่า รอซักแปบนึง DNA ก็จะลอยขึ้นมาครับ แต่ DNA ของมะเขือเทศจะเห็นเป็นสีแดง ๆ น่ะครับ เพราะว่ามันมีเม็ดสีของ มะเขือเทศติดอยู่ด้วยจริง ๆ แล้ว DNA ไม่มีสีนะคับ นี่ก็วิธีกกัด DNA จากพืชง่าย ๆ ครับ ปล. DNA ที่สกัดยังไม่บริสุทธิ์ น่ะครับ http://www.protocol-online.org/prot/Molecular_Biology/DNA/DNA_Extraction___Purification/index.html เข้าเวปนี้ครับ มีให้เลือก 132 Protocol ตามแต่เนื้อเยื่อที่เราอยากจะสกัดครับ เนื้อเยื่อต่างชนิดกันก็มีวิธีสกัดต่างกัน เลือกเอาเลยครับ ขอบคุณมากค่ะ ไม่เป็นไรครับ มีไรสงสัยก็ถามมาได้ครับเรื่อง Molecular |